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山東拓普生物工程有限公司

Shandong Tuopu Biol-Engineering Co.,Ltd

磷酸緩沖液(PB，Phosphate Buffer)，是生物化學(xué)研究中使用最為廣泛的一種緩沖液，通常使用的有磷酸鈉緩沖液(NaH2PO4&Na2HPO4)和磷酸鉀緩沖液(K2HPO4&KH2PO4)，由于它們有二級(jí)解離，緩沖的pH值范圍很廣。

主要作用

PB(Phosphate Buffered)，主要用于化學(xué)實(shí)驗(yàn)。簡(jiǎn)稱:PB或者PB緩沖液

配置方法

0.2M磷酸緩沖液

磷酸緩沖液PH5.7--8.0(0.2M)

甲液:

NaH2PO4·2H2O:Mr=156.03，0.2mol/L溶液為31.21g/L，

NaH2PO4·H2O:Mr=138.01，0.2mol/L溶液為27.6g/L。

乙液:

Na2HPO4·2H2O:Mr=178.05，0.2mol/L溶液為35.61g/L，

Na2HPO4·7H2O:Mr=268.13，0.2mol/L溶液為53.624 g/L ，

Na2HPO4·12H2O:Mr=358.22，0.2mol/L溶液為71.64g/L。

磷酸緩沖液PH5.7--8.0(0.2M)

PH	甲液X(ml)	乙液Y(ml)	PH	甲液X(ml)	乙液Y(ml)
5.7	93.5	6.5	6.9	45	55
5.8	92	8	7	39	61
5.9	90	10	7.1	33	67
6	87.7	12.3	7.2	28	72
6.1	85	15	7.3	23	77
6.2	81.5	18.5	7.4	19	81
6.3	77.5	22.5	7.5	16	84
6.4	73.5	26.5	7.6	13	87
6.5	68.5	31.5	7.7	10.5	89.5
6.6	62.5	37.5	7.8	8.5	91.5
6.7	56.5	43.5	7.9	7	93
6.8	51	49	8	5.3	94.7

根據(jù)要求的PH值,取X毫升甲液與Y毫升乙液,混合均勻即得.

1/15M 磷酸緩沖液

磷酸緩沖液PH4.49--9.18(1/15M)

PH 甲液X(ml) 乙液Y(ml) PH 甲液X(ml) 乙液Y(ml)

4.4 90 10 6.98 64

4.9 40.1 9.9 7.71 7 3

5.29 0.25 9.75 7.58 8 2

5.59 0.5 9.5 7.75 9 1

5.91 19 8.04 9.5 0.5

6.24 2 8 8.2 9.7 0.3

6.47 3 7 8.54 9.75 0.25

6.64 4 6 8.68 9.9 0.1

6.81 5 5 9.18 10 0

乙液:一水磷酸二氫鈉,1/15M溶液含9.2g/L

甲液:二水磷酸氫二鈉,1/15M溶液含11.864g/L

根據(jù)要求的PH值,取X毫升甲液與Y毫升乙液,混合均勻即得.

    緩沖范圍

磷酸緩沖液的緩沖pH值范圍非常廣泛，可配置各種pH值的酸性、堿性和中性緩沖液，配制酸性緩沖液可直接用NaH2PO4或KH2PO4，pH范圍在1-5;堿性緩沖液可直接用Na2HPO4或K2HPO4，pH范圍在9-12;中性緩沖液則用等濃度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等濃度的KH2PO4和K2HPO4溶液混合，pH在5.5-8.5。

濃度范圍

通常所說(shuō)的磷酸緩沖液的濃度是指溶液中含有的所有的磷酸根離子的濃度，而不是鈉離子(Na+)或者鉀離子(K+)的濃度。正是因?yàn)槿绱�，在配制中性緩沖液時(shí)，用等濃度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等濃度的KH2PO4和K2HPO4溶液混合，并不影響磷酸根離子的濃度，所得的緩沖液濃度仍是等濃度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等濃度的KH2PO4和K2HPO4溶液原來(lái)的濃度，但是緩沖液中的鈉離子(Na+)或者鉀離子(K+)的濃度已經(jīng)發(fā)生變化。

優(yōu)缺點(diǎn)

磷酸緩沖液的優(yōu)點(diǎn):(1)易配制各種濃度的緩沖液;(2)適用的pH值范圍寬，可配置各種pH值的緩沖液;(3)pH受溫度影響較小;(4)緩沖能力強(qiáng)，緩沖液被稀釋后pH變化小。

磷酸緩沖液的缺點(diǎn):(1)易與常見(jiàn)的鈣離子Ca2+、Mg2+及一些重金屬離子締合形成沉淀;(2)會(huì)抑制某些生化反應(yīng)過(guò)程，如抑制某些酶的催化過(guò)程等。