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山東拓普生物工程有限公司

Shandong Tuopu Biol-Engineering Co.,Ltd

腸桿菌科細(xì)菌生化鑒定套裝使用說(shuō)明書(shū)

【產(chǎn)品名稱】T141 腸桿菌科細(xì)菌生化鑒定套裝15種(第二代15e)

【包裝規(guī)格】17支/套   1套/盒  10套/包（10盒）

【產(chǎn)品用途】用于腸桿菌科細(xì)菌生化鑒定（應(yīng)滿足革蘭氏染色陰性，氧化酶陰性，葡萄糖發(fā)酵陽(yáng)性）

【貯藏條件】2-8℃避光保存1年

【使用方法】1、從純化平板上挑取待檢菌落于生理鹽水中，制備成約0.5麥?zhǔn)蠞岫鹊木鷳乙海?、使用配套砂輪劃割安瓿瓶藍(lán)點(diǎn)正下方瓶頸處，背向藍(lán)點(diǎn)掰開(kāi)安瓿瓶（戴手套操作），放入安瓿瓶試驗(yàn)盒中；3、移液器移取100ul菌懸液加至安瓿瓶中（斜面生化管需沿斜面滴加菌懸液），葡萄糖酸鹽氧化實(shí)驗(yàn)、半固體瓊脂、葡萄糖半固體發(fā)酵管請(qǐng)單獨(dú)按照注意事項(xiàng)接種操作；4、36±1℃培養(yǎng)，具體培養(yǎng)時(shí)間見(jiàn)下表，出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果后即可停止培養(yǎng)；5、判斷實(shí)驗(yàn)結(jié)果，依照說(shuō)明書(shū)中示例的計(jì)算方法將鑒定結(jié)果填入鑒定表中，計(jì)算得到鑒定編碼；6、查編碼冊(cè)，得到鑒定結(jié)果，如您無(wú)編碼冊(cè)，可將編碼告知我司代為查詢。

【重要聲明】使用本品時(shí)，并不是所有的編碼均有鑒定結(jié)果。這是因?yàn)橛行┥�化反�?yīng)模式不可能出現(xiàn)或目前尚未認(rèn)識(shí)有這樣的菌種。在設(shè)計(jì)本編碼時(shí)，以刪繁就簡(jiǎn)為原則，在項(xiàng)目的排列上以合理為最佳選擇。在使用時(shí)，如發(fā)現(xiàn)查不到鑒定結(jié)果，可重復(fù)鑒定一次或仔細(xì)分析生化實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象以確保判斷的生化反應(yīng)結(jié)果無(wú)誤；如果實(shí)驗(yàn)沒(méi)有問(wèn)題，可結(jié)合16SRNA等鑒定方法進(jìn)行綜合判斷。

【套裝組成及判斷方法】

 【所需配套產(chǎn)品】

S0013--10%三氯化鐵溶液；S0025--班氏試劑；S0001--Kovacs氏靛基質(zhì)試劑； S0006--甲基紅試劑；

C0116--安瓿瓶試驗(yàn)盒

【注意事項(xiàng)】

1、苯丙氨酸培養(yǎng)基：培養(yǎng)結(jié)束后，取出10%三氯化鐵溶液，輕輕搖勻，滴加2~3滴于培養(yǎng)結(jié)束的苯丙氨酸瓊脂斜面，使其沿斜面流下。

2、葡萄糖酸鹽氧化實(shí)驗(yàn): 接種大量新鮮待測(cè)純培養(yǎng)物（菌苔/菌落）于生化管中，培養(yǎng)后滴加班氏試劑（S0025）1ml，充分搖勻；使用鑷子等夾住試驗(yàn)管于沸水中加熱10分鐘，靜置15-30分鐘后觀察結(jié)果；出現(xiàn)黃色-茶色-橙紅色沉淀為陽(yáng)性，仍保持藍(lán)色或藍(lán)綠色為陰性。

3、 蛋白胨水（色氨酸肉湯）用于靛基質(zhì)實(shí)驗(yàn)，培養(yǎng)結(jié)束后滴加Kovacs氏靛基質(zhì)試劑（S0001）2~4滴，立即觀察結(jié)果。出現(xiàn)紅色為陽(yáng)性，無(wú)紅色為陰性。

4、緩沖葡萄糖蛋白胨水(MR-VP)用于甲基紅實(shí)驗(yàn)：培養(yǎng)結(jié)束后，滴加2~3滴甲基紅試劑（S0006），輕輕震蕩，立即觀察結(jié)果，出現(xiàn)紅色為陽(yáng)性，無(wú)紅色為陰性。

5、半固體瓊脂用于動(dòng)力實(shí)驗(yàn)：使用接種針挑取菌苔直立穿刺接種，需保證接種針在培養(yǎng)基內(nèi)直線穿刺不發(fā)生左右偏移。培養(yǎng)結(jié)束后觀察穿刺線上細(xì)菌的生長(zhǎng)情況，若細(xì)菌僅在穿刺線生長(zhǎng)，則無(wú)動(dòng)力；若細(xì)菌有沿穿刺線向四周擴(kuò)散生長(zhǎng)的現(xiàn)象，有動(dòng)力。

6、葡萄糖半固體發(fā)酵管用于產(chǎn)氣實(shí)驗(yàn)：使用接種針挑取菌苔直立穿刺接種。培養(yǎng)結(jié)束后觀察結(jié)果。如瓊脂內(nèi)有氣體或發(fā)生破裂，則為陽(yáng)性反應(yīng)；沒(méi)有氣體為陰性反應(yīng)。

7、賴氨酸脫羧酶肉湯、鳥(niǎo)氨酸脫羧酶肉湯和氨基酸脫羧酶對(duì)照三支生化管接菌后應(yīng)立即覆蓋200-300ul的無(wú)菌液體石蠟，然后培養(yǎng)。按上表結(jié)合對(duì)照管一起觀察結(jié)果。本實(shí)驗(yàn)有時(shí)較難判斷，建議于10h、20h、30h、40h左右多次觀察結(jié)果，結(jié)合對(duì)照管的顏色變化進(jìn)行綜合判斷。

8、關(guān)于培養(yǎng)時(shí)間的說(shuō)明：培養(yǎng)時(shí)間為1-2天，多數(shù)細(xì)菌繁殖較快，培養(yǎng)1天即可；如確實(shí)無(wú)法判斷細(xì)菌繁殖快慢，實(shí)際操作時(shí)可培養(yǎng)兩天，但是建議在培養(yǎng)10h、20h、30h、40h左右聯(lián)系觀察記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。對(duì)于糖醇發(fā)酵管而言，培養(yǎng)過(guò)程中如出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)，即使長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)后，黃色等顏色變回綠色，仍應(yīng)判陽(yáng)性反應(yīng)。

9、本品附帶4頁(yè)鑒定表，每頁(yè)3張，共計(jì)12張，用于鑒定結(jié)果的記錄。

10、應(yīng)急處置：使用時(shí)應(yīng)佩戴手套，如不慎與身體直接接觸，應(yīng)立即用水沖洗至少15分鐘。

11、本品僅用于微生物檢測(cè)，不用于體外診斷。

【編碼示例】

1、  將判斷得到的生化反應(yīng)結(jié)果填入下表，陽(yáng)性結(jié)果為“+”，陰性結(jié)果為“-”。

2、  單值指的是預(yù)先賦予該實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的數(shù)值，只有當(dāng)該實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目呈陽(yáng)性反應(yīng)時(shí)方可計(jì)入。

3、  將實(shí)驗(yàn)分成了5組，分組計(jì)算各自陽(yáng)性反應(yīng)對(duì)應(yīng)的單值之和得到總值。